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Artículo • Agron. Costarricense 45 (2) • 10 Jul-Dec 2021 • https://doi.org/10.15517/RAC.V45I2.47767 linkcopiar

Open-access Identificación de fusarium en granos de frijol negro (phaseolus vulgaris l.) en Costa Rica

Identification of Fusarium species in black bean grains (Phaseolus vulgaris L.) from Costa Rica

AutoríaSCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

    Resumen

    Introducción. El frijol común (Phaseolus vulgarisL.) es una leguminosa consumida ampliamente en países en vías de desarrollo. En Costa Rica su consumo es alto (10,54 kg.persona-1.año-1) y su producción se localiza principalmente en regiones al sur y al norte del país. Los granos de esta leguminosa podrían estar contaminados conFusarium, un hongo micotoxigénico que coloniza diferentes cultivos. Objetivo. Identificar las especies deFusariumque colonizan los granos de frijol negro en Costa Rica. Materiales y métodos. Se recolectaron 49 muestras de granos de frijol negro durante 2017, 2018 y 2019 en regiones donde se produce este grano en Costa Rica. Estas se utilizaron para aislar e identificar las especies deFusariumbasado en secuencias parciales de los genesTEF-1α(factor de elongación de la traducción 1-alfa) yRPB2(subunidad de la ARN polimerasa II). Resultados. Se obtuvieron 28 aislamientos deFusarium,de los cuales 82% pertenecen al complejo de especiesFusarium incarnatum-equiseti(FIESC). La presencia de especies deFusariumvarió según el año de recolección; en el 2018 se encontró la menor prevalencia (43%) y el 2019 la mayor (76%). El 71% de las especies deFusariumse aislaron de muestras recolectadas en la región sur del país.F. equisettise aisló solo de una muestra procedente de la región Atlántica, mientras queF. incarnatum,F. oxysporumyF. verticillioidesse encontraron distribuidos en muestras colectadas en diferentes regiones del país. Conclusión. El presente estudio demostró la diversidad de especies deFusariumque colonizan los granos de frijol negro en Costa Rica según la ubicación geográfica y el año de recolección de la muestra. La mayoría de las especies aisladas resultaron productoras de micotoxinas que causan efectos adversos en la salud humana.

    Palabras clave: común; Phaseolus vulgaris; Costa Rica

    Abstract

    Introduction. The common bean (Phaseolus vulgarisL.) is a legume that is widely consumed in developing countries. In Costa Rica, its consumption is still high (10.54 kg.person-1.year1), and its production is mainly located in the southern and the northern regions of the country. The grains of this legume could be contaminated withFusarium,a mycotoxigenic fungus that colonizes different crops. Objective. IdentifyFusariumspecies that colonize the grains of Costa Rican black beans. Materials and methods. Forty-nine samples of black bean grains were collected during 2017, 2018 and 2019 in different regions where this grain is produced in Costa Rica. Those were used to isolate and identify theFusariumspecies based on the partial sequences ofTEF-1α(translation elongation factor 1-alpha) andRPB2genes (RNA polymerase II subunit). Results. A total of 28Fusariumisolates were obtained, of which 82% belong to theFusarium incarnatum-equisetispecies complex (FIESC). The presence ofFusariumspecies was high and varied according to the year of sample collection; thus 2018 was the year in which the lowest prevalence was found (43%) and 2019 the highest (76%). Seventy-one percent of theFusariumspecies were isolated from samples collected in the Brunca region in southern Costa Rica.F. equisettiwas isolated only from one sample obtained from the Huetar Atlántica region, whileF. incarnatum,F. oxysporumandF. verticillioideswere found distributed in samples collected in different regions of the country. Conclusion. The present study demonstrates the diversity ofFusariumspecies colonizing black bean grains in Costa Rica according to the geographical location and the year of collection of the samples. Most of the isolated species are well known producers of mycotoxins that cause adverse effects on human health.

    Keywords: common beans; Phaseolus vulgaris; Costa Rica

    Introducción

    El frijol común (Phaseolus vulgarisL.) es una leguminosa originaria de América; se extiende desde el norte de México, Centroamérica, hasta el noroeste de Argentina (Blairet al.2010). Actualmente, esta leguminosa, junto con otras 5 especies domesticadas pertenecientes al géneroPhaseolus,son las más consumidas principalmente en África, Asia y América Latina (FAO 2019). El grano contribuye a la seguridad alimentaria en esas regiones, debido a su alto valor nutricional como fuente de proteínas, minerales, vitaminas y antioxidantes (Broughtonet al.2003, Oomahet al.2005, Geptset al.2008, Blairet al.2010, Mensacket al.2010). En Costa Rica, es de alto consumo (10,54 kg.persona-1.año-1) (FAO 2018) y ocupa el segundo lugar en área cosechada y sembrada después del arroz (SEPSA 2018). La producción de frijol durante el período 2018/2019 fue de 9510 toneladas (SEPSA 2019). La mayor producción se obtiene de la Región Brunca (51%), seguido de la Región Huetar Norte (30%), mientras que el resto de la producción se localiza en la Región Chorotega (16%) y otras regiones del país que producen menos del 3% (SEPSA 2019).

    Los hongos que colonizan los granos de frijol afectan su calidad e inocuidad, por lo tanto, su identificación reviste importancia. Algunos de estos hongos son micotoxigénicos, los cuales, bajo condiciones de temperatura y humedad óptimas, pueden producir metabolitos secundarios conocidos como micotoxinas que afectan la salud humana y animal (Perroneet al.2020). La contaminación de granos y cereales por micotoxinas es de interés mundial, ya que se estima que el 25% de los productos agrícolas están contaminados con estas toxinas (Eskolaet al.2019) y su ingestión puede causar enfermedades en humanos a mediano y largo plazo como cáncer o inmunodeficiencias (Omotayoet al.2019). Se conocen más de 300 micotoxinas, entre ellas las aflatoxinas, fumonisinas, ocratoxinas, patulina, tricotecenos y zearalenona las de mayor relevancia pues afectan la seguridad alimentaria (Marínet al.2013, Omotayoet al.2019).

    FusariumLink es un género de hongos ampliamente distribuido y ha sido identificado como agente causal de enfermedades en diferentes cultivos, así como generador de numerosas micotoxinas (Summerellet al.2010). Las principales toxinas producidas porFusariumson fumonisinas, zearalenona y tricotecenos tipo A (HT-2 y toxina T-2) y tipo B (deoxinivalenol y nivalenol) (Munkvold 2017, Jiménez-Garcíaet al.2018). Las especies pertenecientes a este género son saprófitas o patógenas (Singleton y Sainsbury 2006) y la mayoría de ellas producen micotoxinas, principalmente las siguientes:F. acuminatum,F. langsethiae,F. poae,F. sambucinum,F. sporotrichioides,F. venenatum(productoras de tricotecenos tipo A),F. graminearum,F. culmorum,F. crookwellense,F. pseudograminearum,F. venenatum(productoras de tricotecenos y zearalenona tipo A),F. proliferatumyF. verticillioides(productoras de fumonisinas) (Munkvold 2017). A diferencia de otros hongos, que contaminan los granos durante el secado y almacenamiento,Fusariumpuede colonizar y producir toxinas tanto en el campo, en la poscosecha como en el almacén (Antonissenet al.2014).

    La mayor parte de la investigación relacionada conFusariumy la prevalencia de micotoxinas asociadas a este hongo, se centra en cultivos de alta demanda en todo el mundo, como los cereales (Cinar y Onbaşı 2019). En granos de frijol común, por el contrario, hay poca información. Existen solamente 4 estudios a nivel mundial que reportan la presencia deFusariumen granos de frijol común (Hitokotoet al.1981, Abdel-Hafez 1984, Tsenget al.1995, Castilloet al.2004); sin embargo, el reporte más reciente es del 2004 y otros estudios, no precisan el tipo de frijol analizado. Por un lado, Castilloet al.(2004) reportaron resultados de frijol negro producido en Latinoamérica, mientras que en Canadá, Japón y Taiwán reportaron la presencia de diferentes especies deFusariumen granos de frijol:F. culmorum,F. graminearum,F. oxysporum,F. solaniyF. verticillioides(Hitokotoet al.1981, Tsenget al.1995). Además, Abdel-Hafez (1984) reportó 3 especies deFusarium(F. oxysporum,F. solani, F. verticillioides) en frijoles de Arabia Saudita; entretanto Castilloet al.(2004, 2002) reportaron varias especies deFusariumy sus micotoxinas asociadas en granos de frijol negro argentino.

    Debido a la necesidad de más información sobre las especies deFusariumpresentes en el frijol común cultivado en Latinoamérica, incluída Costa Rica, resulta necesario identificar las especies que colonizan este grano, aspecto que contribuiría a determinar el riesgo de contaminación por micotoxinas en frijol y buscar alternativas futuras para su manejo. El objetivo del presente estudio fue identificar las especies deFusariumque colonizan los granos de frijol negro en Costa Rica.

    Materiales y métodos

    Aislamiento de los hongos. En 2017, 2018 y 2019, se recolectaron durante la poscosecha 49 muestras de grano, de 500 g cada una, de frijol común (P. vulgarisL.) de color negro, en diferentes regiones productoras de esta leguminosa en Costa Rica (Brunca, Central, Chorotega, Huetar Atlántico y Huetar Norte). Los granos se recolectaron en las fincas de personas productoras luego de la cosecha por lo que se encontraban almacenados por un período de no mas de 30 días antes de salir a la venta al mercado. El grano de frijol recolectado se almacenó en bolsas plásticas que contenían entre 0,5-1 kg de grano cada una y se colocaron en una cámara fría a 5°C (41°F) y 85% humedad relativa. Se almacenaron en esas condiciones por un período menor a 24 meses hasta el aislamiento fúngico.

    Luego, el aislamiento de los hongos de cada muestra se realizó de la siguiente manera: se lavaron 50 g de frijol 3 veces con agua destilada esterilizada en autoclave (121°C, 1,05 kg.cm−2, 20 minutos). Después del último lavado, se colocaron 4 granos de frijol en placas Petri de 90 mm que contenían agar extracto de malta con pH de 5,5 (20 g.L-1de agar bacteriológico (Oxoid®) y 20 g.L-1de extracto de malta (DifcoTM)). Se realizaron 10 repeticiones por muestra, cada una compuesta por una placa de Petri con 4 granos de frijol. Los granos se incubaron a 25°C (77°F) en la oscuridad hasta que se observó el crecimiento de hongos (2-3 días de incubación). Se tomó una sección de aproximadamente 0,5 cm de micelio del margen de la colonia en activo crecimiento y se colocó en placas de Petri de 53 mm con agar extracto de malta. Se incubaron a 25°C por un período de 7 días en oscuridad. Luego de este tiempo, se observaron al microscopio secciones de micelio y esporas de cada cultivo y se eligieron los aislamientos que de acuerdo con Leslie y Summerell (2006), presentaban características distintivas deFusarium, que incluían la forma y longitud de las esporas.

    Para la preparación de los cultivos monospóricos, se tomaron esporas asexuales de los aislamientos seleccionados y se prepararon mediante el método de dilución seriada descrito por Leslie y Summerell (2006) con las siguientes modificaciones: se agregaron 500 µl de agua del grifo autoclavada a cada placa que contenía micelio y la solución se mezcló mediante pipeteo para separar las esporas del micelio. La solución de esporas se colectó en un tubo de 2 ml y se utilizó una alícuota para calcular la concentración de esporas con un hemocitómetro Fuchs-Rosenthal (Thomas Scientific, Horsham, PA, EE. UU.). La solución de esporas se diluyó para obtener 0,6 esporas.µl-1y se cultivó 50 µl en placas de Petri de 90 mm que contenían Czapek Dox Agar (CDA, 50,01 g.L-1, pH 8,2, PhytoTechnology Laboratories®). Los 50 µl se distribuyeron de forma homogénea sobre el medio de cultivo con ayuda de una espátula de Drigalski. Cada solución de esporas se cultivó de la misma manera por triplicado y se incubó a 25°C en oscuridad hasta que la germinación de cada espora fue visible a simple vista. Luego de 24 horas de incubación, 3 microcolonias de cada aislamiento se transfirieron por separado a un nuevo plato Petri con CDA y se incubaron en las mismas condiciones hasta que se produjo suficiente micelio para la extracción de ADN. Los aislamientos se numeraron consecutivamente de F1 a F79 para facilitar la identificación.

    Identificación molecular de los aislamientos deFusarium. El micelio proveniente de 79 cultivos monospóricos se separó cuidadosamente del medio y se liofilizó durante 3 días para eliminar totalmente el agua del material. El ADN se extrajo a partir de 20 mg de micelio macerado según el método de extracción de ADN a gran escala de (Brandfass y Karlovsky 2008). La identificación molecular de los aislamientos se realizó mediante PCR en tiempo real y secuenciación con cebadores específicos diseñados para amplificar una región corta y variable de los genesTEF-1α(factor de elongación de la traducción 1-alfa) yRPB2(subunidad de la ARN polimerasa II) enFusarium(Tabla 1).

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    Tabla 1
    Secuencia de los cebadores utilizados para la identificación de los aislamientos deFusariumobtenidos de granos de frijol común de color negro (Phaseolus vulgarisL.).

    La correcta amplificación de ambos cebadores enFusariumse validó previamente con ADN de los siguientes controles positivos:F. avenaceumDSM62161,F. culmorumDSM62118,F. graminearumNRRL13383,F. langsethiaeESIER1400,F. oxysporumDSM62338,F. poaeDSM62376,F. sporotrichioidesDSM62423,F. tricinctumDSM23357 yF. verticillioidesNRRL20956. El ADN de los controles positivos fue donado por el Prof. Dr. Petr Karlovsky (Molecular Phytopathology and Mycotoxin Research, Universidad de Göttingen, Alemania) y los hongos, a partir de los cuales se obtuvo el ADN fueron adquiridos en la DSMZ (German Collection of Microorganism and Cell Cultures GmbH). La PCR en tiempo real se realizó en un termociclador Rotor-Gene Thermal Cycler RG-6000 (Corbett Research, Australia) y cada reacción de PCR se compuso de 12,3 μL de mezcla maestra MeltDoctor (Applied Biosystems®, Thermo Fisher Scientific, EE. UU.), 0,35 μM de cebadores directos e inversos (Tabla 1) y 2 μL de ADN (17-167 ng μL-1) en un volumen final de 15 μL. Se utilizaron las siguientes condiciones de PCR para ambos cebadores: 95 °C durante 10 min, 40 ciclos de: 95°C durante 15 s y 60°C durante 1 min. Tras el ciclo final de la PCR, se llevó a cabo el análisis de las curvas de temperatura de fusión que se inició a 95° C con una disminución de 0,3°C a 50°C, esto para corroborar la amplificación y la especificidad de los amplicones. Los productos de PCR se enviaron a Macrogen (Corea del Sur) para su secuenciación. Se verificó la calidad de las secuencias y se realizó el alineamiento de las mismas con el empleo de la herramienta de alineación múltiple ClustalW (Thompsonet al.1994). Se eliminaron las secciones de secuencias que mostraban cromatogramas irregulares en los extremos 5’ y 3’ para evitar errores durante la identificación de las especies.

    Las especies deFusariumse identificaron mediante la herramienta Blast (Basic Local Alignment Search Tool) del Centro Nacional de Información Biotecnológica (NCBI) y se compararon con secuencias de la base de datos del GenBank (Clarket al.2016). El análisis filogenético se realizó mediante el método de máxima verosimilitud con el programa MEGA-X (Análisis genético evolutivo molecular) versión 10.1 (Kumaret al.2018). Los valores de bootstrap se generaron en cada nodo con 1000 réplicas.

    Resultados

    Prevalencia deFusariumen granos de frijol negro.De las 49 muestras de frijol negro, se obtuvieron 79 aislamientos de hongos que se codificaron consecutivamente de F1 a F79. De esos 79 aislamientos, 28 (35%) fueron categorizados dentro del géneroFusariumy se identificaron posteriormente a nivel molecular. Los demás hongos fueron descartados. La presencia de diferentes especies deFusariumvarió según el año de recolección de la muestra. En el 2017, el 50% de las muestras de frijol negro recolectadas estaban contaminadas con al menos una especie deFusarium, mientras que en el 2018 y el 2019, el 43% y 76% de las muestras estuvieron contaminadas conFusariumrespectivamente.

    Identificación molecular de los aislamientos deFusarium.Del total de aislamientos deFusarium, 82% fueron identificados dentro del complejo de especiesFusarium incarnatum-equiseti(FIESC) y clado VII según Watanabeet al.(2011) (Tabla 2 y Figura 1). Las especies identificadas dentro del FIESC fueron:F. hainanense,F. equisetiyF. Incarnatum; solo el 11% de los aislamientos (3 aislamientos) se identificaron comoF. oxysporumy el 7% comoF. verticillioides(2 aislamientos).

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    Tabla 2
    Identificación de las especies deFusariumaisladas de granos de frijol negro (Phaseolus vulgarisL.).

    Figura 1
    Árbol de máxima verosimilitud de los aislamientos deFusariumobtenidos a partir de granos de frijol negro (Phaseolus vulgarisL.) en Costa Rica.

    Las similitudes se infirieron a partir de las secuencias parciales combinadas de los genesRPB2yTEF-1α. En cada nodo se muestran los valores de Bootstrap superiores al 70% para 1000 réplicas.

    FIESC = complejo de especiesFusarium incarnatum-equiseti, FFSC = complejo de especiesFusarium fujikuroi, FOSC = complejo de especiesFusarium oxysporum.

    La separación de clados se basó en (Watanabeet al.2011). F# = código del aislamiento deFusarium. Se utilizóPenicillium digitatumcomo grupo externo.

    Las especies más abundantes deFusariumen el 2017 y 2019 incluyeron las pertenecientes al complejo de especiesFusarium incarnatum-equiseti(FIESC), mientras que en el 2018 la mayoría de las muestras estaban contaminadas conF. incarnatum(Figura 2). Por otro lado,F. equisetti, solo estuvo presente en una muestra del 2018 yF. oxysporumestuvo presente en los 3 años evaluados, mientras queF. verticillioidessolo en muestras del 2017 y 2018 (Figura 2).

    Figura 2
    Prevalencia de especies deFusariumaisladas de granos de frijol negro (Phaseolus vulgarisL.) recolectadas en 2017, 2018 y 2019 en Costa Rica. La identificación de las especies se realizó según las secuencias parciales combinadas de los genes RPB2 y TEF-1α (ver Tabla 2). Los porcentajes dentro de cada cuadrado se refieren a la prevalencia deFusariumspp. en cada año.

    La mayoría de las muestras fueron recolectadas en Pérez Zeledón, San José (Región Brunca) (Tabla 3), de las cuales se aisló el 71% de las especies deFusarium. De los frijoles de esta Región se recuperaron 4 de las 6 especies identificadas deFusariumen granos de frijol negro:F. hainanense,F. incarnatum,F. oxysporumyF. verticillioides, además, se aislaron especies que no pudieron ser identificadas pertenecientes al complejo de especies FIESC (Fusarium sp.FIESC) (Tabla 3).F. equisettise aisló solo de una muestra proveniente de la Región Huetar Atlántica (Siquirres, Limón), mientras queF. incarnatum,F. oxysporumyF. verticillioidesse encontraron distribuidos en muestras de frijol de diferentes regiones del país.

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    Tabla 3
    Especies deFusariumaisladas de granos de frijol negro (Phaseolus vulgarisL.) recolectadas en diferentes regiones agroecológicas. Costa Rica durante 2017, 2018 y 2019.

    Discusión

    Diversas especies deFusariumhan sido previamente aisladas de suelos, raíces, tallos y hojas del cultivo de frijol común (Phaseolus vulgarisL.). La mayoría de estas especies han sido identificadas comoF. oxysporumoF. solaniy están relacionadas a enfermedades como fusariosis o podredumbre radicular (Alves-Santoset al.1999, Montiel-Gonzálezet al.2005, Macedoet al.2017, Cruzet al.2018). Existen pocos estudios que reporten la presencia de especies deFusariumque colonicen granos de frijol común a nivel mundial. Hitokotoet al.(1981), reportaron la presencia deFusariumen granos de frijol común colectados en mercados en la ciudad de Tokio, Japón, sin embargo, no identificaron las especies. Abdel-Hafez (1984) aislóF. oxysporumyF. solania partir de granos de frijol común en Arabia Saudita; mientras que Tsenget al.(1995) identificaron 5 especies deFusariumen granos de frijol canadiense con una incidencia de 18%. En América Latina, (Castilloet al.2002, 2004) reportaron la presencia de algunas especies deFusariumen granos de frijol negro argentino, la mayoría identificadas comoF. semitectum(prevalencia del 11%)y F. graminearum(prevalencia del 4,8%).

    La mayoría (82%) de las especies deFusariumaisladas de granos de frijol negro en Costa Rica, en el presente estudio, pertenecían al complejo de especies FIESC (F. hainanense,F. incarnatum,F. equisetiy otras), aunque también se identificaronF. oxysporumyF. verticillioides(Figura 1 y Tabla 2). Algunas de esas especies ya han sido reportadas en granos de frijol común en otros países (Abdel-Hafez 1984, Tsenget al.1995, Castilloet al.2002, 2004); no obstante, este es el primer reporte deF. hainanenseyF. incarnatumidentificados en granos de frijol común. Conocer las especies deFusariumque colonizan los granos es relevante, ya que muchas pueden biosintetizar micotoxinas, metabolitos secundarios que tienen efectos adversos para la salud humana y animal (Wuet al.2014, Ostryet al.2017). Varios miembros del complejo de especies FIESC son saprófitos y oportunistas; además, algunos de ellos son conocidos por su capacidad para producir micotoxinas como beauvericina (Logriecoet al.1998), diacetoxiscirpenol, fusarenona X, nivalenol (Villaniet al.2016), zearalenona y deoxinivalenol (Avilaet al.2019).

    Las otras 2 especies deFusariumno pertenecientes al FIESC que se identificaron en las muestras de frijol común negro en Costa Rica,F. oxysporumyF. verticillioides, son importantes patógenos que colonizan las plantas, pero difieren en su potencial micotoxigénico. Por ejemplo,F. oxysporumno es un hongo conocido por su capacidad micotoxigénica, aunque se ha reportado que esta especie produce algunas micotoxinas dentro del grupo de los tricotecenos (Leeet al.1986, Mirochaet al.1989, Richardet al.2007, Liet al.2016). AsimismoF. verticillioideses una de las especies deFusariummás relevantes por su capacidad para producir micotoxinas. Esta especie produce fumonisinas que son reconocidas por su potencial cancerígeno en humanos y animales (Norred 1993, Covarelliet al.2012, Ostryet al.2017).

    Trabajos de investigación previos reportaron prevalencia deFusariummenor al 19% en granos de frijol común (Hitokotoet al.1981, Abdel-Hafez 1984, Tsenget al.1995, Castilloet al.2002, 2004), lo cual contrasta con estos resultados. En el presente trabajo se encontró una prevalencia deFusariumde más del 43% en las muestras de granos de frijol negro colectadas en diferentes años (Figura 2). Estas muestras fueron recolectadas después de la cosecha en condiciones de almacenamiento en campo similares a las de Castilloet al.(2002, 2004); sin embargo, esas personas autoras reportaron alrededor de un 19% de prevalencia deFusariumen granos de frijol negro argentino. Las condiciones climáticas pudieran explicar estas diferencias, ya que el frijol argentino proviene de la provincia de Salta, donde la temperatura y precipitación promedio anual son 20°C (68°F) y 500 mm, respectivamente (Portal informativo de Salta 2020). Mientras que en Pérez Zeledón (Región Brunca). En Costa Rica, donde se recolectaron la mayoría de las muestras en este estudio se presentó una temperatura promedio anual de 23°C (74°F), pero la precipitación promedio anual es mucho más alta, 2944 mm (Climate-data.org 2020). Los patrones de alta precipitación se han relacionado previamente con la infestación porFusariumen cereales y granos (Gamanya y Sibanda 2001, Bernhoftet al.2012, Tsehayeet al.2017) por lo que se esperarían valores elevados de prevalencia de este hongo en zonas de alta precipitación como Pérez Zeledón.

    El presente estudio mostró por primera vez la diversidad de especies deFusariumen granos de frijol negro en Costa Rica, donde la ubicación geográfica es considerada región agroecológica así como el año de recolección de la muestra. La prevalencia de especies deFusariumen los granos de frijol negro fue alta, pues llegó a un 76% en muestras recolectadas en el 2019. La mayoría de los aislamientos deFusariumpertenecen al complejo de especies FIESC que tienen varios integrantes con potencial micotoxigénico. Además, se identificaron 2 importantes especies fitopatógenas deFusarium:F. oxysporumyF. verticillioides; esta última conocida por su potencial toxigénico, ya que produce fumonisina, una de las micotoxinas más relevantes desde el punto de vista de salud humana. Debido a que la capacidad de un hongo comoFusariumpuede causar enfermedades en una planta o producir micotoxinas depende del sustrato y de las condiciones ambientales, se deberían realizar investigaciones complementarias para determinar el potencial que tienen, las especies identificadas en el presente estudio de causar enfermedades o producir micotoxinas en el frijol negro en Costa Rica.

    Agradecimientos

    Las autoras agradecen a la Vicerrectoría de Investigación de la Universidad de Costa Rica por el apoyo financiero otorgado para el desarrollo de esta investigación en el marco del proyecto VI-734-B9-038.

    Literatura citada

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    • *
      Esta investigación formó parte de la tesis de licenciatura de la primera autora.

    Fechas de Publicación

    • Fecha del número
      10 Jul-Dec 2021

    Histórico

    • Recibido
      29 Set 2020
    • Acepto
      16 Dic 2020
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